Билет № 28

1)

29. Определение активности альфа-амилазы и липазы в сыворотке крови. Клинико-диагностическое значение.

Альфа-амилаза (диастаза) – фермент, осуществляющий гидролитическое расщепление полисахаридов (крахмала, гликогена, амилозы и других продуктов, содержащих 3 и более остатка Glc) до декстринов и мальтозы.

Наиболее богаты этим ферментом ПЖ и слюнные железы, хотя высокую амилолитическую акт-сть проявляют также фаллопиевые трубы, киш-к, печень, почки, легкие, жировая ткань. Ур-нь α-амилазы в крови во многом зависит от функц-ного состояния печени. В крови 2 изоэнзима: панкреатический (Р) – 3 изоформы – и слюнной (S) – 7 изоформ.

С мочой выдел-ся в основном Р-амилаза и это обусл-ет большую информат-сть опр-ния акт-сти α-амилазы в моче как теста оценки функционального состояния ПЖ. Полагают, что 65% амилазной активности мочи обусловлено панкреатической амилазой, в то время как 60% амилолитической активности сыв-ки обеспечивается амилазой сл/ж. Этим и объясняется то обстоятельство, что при о. панкреатите именно Р-амилаза ↑ свою акт-сть в сыв-ке крови (до 89%) и особенно в моче (92%) без изм-ний показателей акт-сти амилазы сл/ж в этих биол-ких жидкостях. У практически здоровых людей содержание сл. и панкр амилазы в крови ≈, в моче же ур-нь панкреатической амилазы в 2 раза выше.

Методы изучения активности α-амилазы в биожидкостях (сыв-ке, моче, поте) делятся ан 2 основные группы:

1. Сахарирующие, основанные на исследовании образующихся из крахмала сахаров по редуцирующему действию Glc и мальтозы.

2.Амилокластические, базирующиеся на опр-нии остатка нерасщепленного крахмала по ст-ни интенсивности его реакции с йодом. Для оценки объема расщ-ия крахмального субстрата используют турбидиметрический, йодометрический (избыток негидролизованного субстрата+йод= окраш-ое соед) или нефелометрический способ его определения.

КДЗ. Активность а-а. крови и мочи в теч сут значительно меняется. Учитывая колебания экскреции а-а. с мочой, рекомендуется исследовать исследовать акт-ть фермента в моче, собранной за сутки. Питание: при увел-ии утилизации глюкозы содержание а-а. в крови снижается. Эмоциональные, стрессовые состояния, напротив, приводят к гиперамилаземии. Изменяется при беременности (до 19 нед – умен-ся, затем увел-ся достигая максимума к 33-34 нед Бер-ти, на 37-40 незнач снижается.

Гиперамилаземия. При заб-ях подж/ж: о. панкреатит – увел-ся в 10-40 раз. Максимума достигает ч/з 12-24 ч, затем быстро снижается и приходит к норме на 2-6 сут. Обычно гипарамилазурия длится дольше, чем гиперамилаземия. Возможно развитие о. панкреатита и без повышения активности фермента в частности при тотальном панкреонекрозе. Известно, что акт-ть а-а. подавляется при действии большого кол-ва молекул нейтральных жиров на активный центр фермента. В связи с этим следует особенно внимательно подходить к интерпретации результатов исследования активности а-а. у больных панкреатитом с сопутствующим нарушением липидного обмена. Это обусловлено тем, что панкреатическая липаза способна превращать триацилглицерины в свободные ЖК, повреждающие железу.

Пов-ие акт-ти м.б. при о. аппендиците, перитоните (развиваются образующие амилазу бактерии), перфоративной язве желудка и 12 п.к., холецистит, состояние связанной с разрывом желчного пузыря, заб-ия почек, почечную недост-ть, метастазирование раковой опухоли в легкие, поражение сл/ж с абтурацией их протоков, простатит,ЧМТ, травмат шок, ожоги, пневмонии, диабетический кетоацидоз, прерывание беременности, послеоперационный период.

Исследование акт-ти а-а. в суточной моче – более надежный биохимический тест выявления заболевания подж/ж, чем исследование разовой ее порции. После того как активность а-а. крови после приступа панкреатита возвратится к норме, она м. оставаться повышенной в моче до 7 сут.

Повышение активности а-а. в сыв-ке крови у больных с хр заб-ями почек и о. уремией м. объяснить уменьшением или прекращением выделения фермента ч/з почки.

Гипоамилаземия в клинической практике встречается редко. С заб-ями печени (гепатит, цирроз), злок опухолями, обширные ожоги кожи, сах диабет, гипотиреоз, общее расстройство питания, падение массы тела, кахексия, интоксикация (токсикоз), что чаще связано с недостаточностью эндокринной функции подж/ж. к уменьшению активности фермента приводит введение в организм цитратов и оксалатов.

Липаза. Время исп-ся для обозначения ферментов, сп-х расщеплять нейтральные жиры (сложные эфиры глицерола и высших карбоновых кислот).

Липаза панкреатическая (ПЛ) – фермент поджелудочной железы, участвующий в расщеплении липидов, поступающий в ЖКТ вместе с пищей.

Для исследования фермента нужна предварительная активация с использованием тонкодисперсной эмульсии жира, поскольку на границе «масло-вода» происходит развертывание глобулы ф с высвобождением активных центров молекул. ПЛ водорастворима и ее действие ограничивается поверхностью жировых глобул. Желчные кислоты ум-ют поверхностное натяжение, что приводит к образованию эмульсий в тонком кишечнике => увелич контакта м/д жирами и липазой; активизируют ф. ПЛ ингибируется свободными жирными к.

Среди лаб способов исследования внешнесекреторных функций ПЖ различают:

1. Титриметрические методы, учитывающие образовоние жирных к в процессе распада их глицериновых эфиров (состоят в титровании щелочью жирных к)

2. Сталагмометрические, базирующиеся на регистрации изменения поверхностного натяжения – сталагмометрия

3. Турбидиметрические, основанные на оценке степени мцтности раствора

4. Газометрические, состоящии в определении объема СО2, выделяемого под действием освободившихся жирных к на гидрокарбонаты.

Перечисленные методики не нашли широкого распространения из-за небольшой спец-сти, низкой точности.

5. Колориметрические, с использ хромогенных субстратов.

КДЗ: ↑ акт-сти при панкреатите, особенно остром. У больных панкреатитом одновременно исследуют акт-сть в крови и моче (т.к. в моче выше). ↑ - при желчной колике, странгуляции или инфаркте кишки, перфорации полого органа, ожирения, подагре, у части больных с СД, уремии, о недостаточности почек.

↓ - при туберкулезе, сифилисе, раке, при инфекционных заб, по мере прогрессирования процесса активность снижается.

Норма - > 190 Е/л, при о панкреатите, задержке желчи в печени, хр панкреатите (обструктивном), недостаточности деят-сти почек значительно увеличивается.