10. Иммунитет

После перенесенного заболевания в сыворотке крови обнаруживаются антитела к токсину и к бактериям, что свидетельствует о комплексном характере иммунного ответа. Естественный иммунитет после перенесенного заболевания отсутствует, поскольку токсигенная доза ботулотоксина во много раз ниже иммуногенной (6 кг ботулотоксина способны убить все человечество). Чувствительность к ботулиническому токси­ну у различных животных подвержена резким колебаниям. Абсолютно резистентные виды неизвестны, но всеядные животные обладают меньшей чувствительностью.

11. Методы лабораторной диагностики

Цель исследования — обнаружение и идентификация токсина, выделение возбудителя является второстепенной задачей. Исследуемым материалом являются остатки пищевых продуктов, материал, полученный от больного (кровь, испражнения, моча, промывные воды желудка, рвотные массы и др.). Исследование проводят одновременно в двух направлениях: обнаружение ботулотоксина (за искл. испражнений) и выделение возбудителя (за искл. крови). Ботулотоксин определяют в биопробе на мышах или с использованием серологических реакций (ИФА, РПГА). Определение типа токсина крайне важно для назначения специфической антитоксической терапии. Для проведения биопробы отбирают партию из 5 животных. Первое заражают исследуемым материалом, а остальным вводят смесь исследуемого материала и 2 мл 200 МЕ определенной антитоксической сыворотки А, В, С и Е. При наличии в материале токсина животные умирают, а выживает животное, получившее антисыворотку, нейтрализовавшую токсин соответствующего типа. Для идентификации токсинов с помощью РПГА используют антительный диагностикум (эритроциты, сенсибилизированные специфическими антитоксинами).

Банки с консервированными продуктами выдерживают в термостате 10-12 суток, растирают, центрифугируют: в надосадочной жидкости определяют наличие токсина, а в осадке — возбудителя. Методы получения культур возбудителя ботулизма аналогичны методикам, используемым при других клостридиозах (табл.9).

Таблица 9. Схема бактериологического метода диагностики ботулизма

I этап	1 день	Посев исследуемого материала на среду Китта-Тароцци (среду накопления) или сразу на сахарно-кровяной агар и высокий столбик сахарного МПА, инкубация в анаэробных условиях 37°С
	2 день	1. Изучение культуральных свойств Сахарно-кровяный агар: неправильной формы колонии с отростками или ровными краями, окруженные зоной гемолиза Высокий столбик сахарного МПА: в виде комочков ваты или чечевицы 2. Пересев на среду Китта-Тароцци с целью выделения чистой культуры
II этап	3 день	1. Идентификация чистой культуры по: морфологическим и тинкториальным свойствам (крупные грам+ палочки с субтерминально расположенной спорой — «теннисные ракетки») культуральным (строгие анаэробы, на сахарно-кровяном агаре неправильной формы колонии с отростками или ровными краями, окруженные зоной гемолиза; в высоком столбике сахарного МПА колонии в виде комочков ваты или чечевицы токсигенности и типу токсина (используют биопробу на мышах с поливалентной антитоксической сывороткой и для определения типа токсина с моновалентными сыворотками; ИФА и РПГА для определения типа токсина)