III. План практической работы

1. Учесть развернутую реакцию агглютинации в диагностике сыпного тифа, поставленную с риккетсиями Провачека и Музера, зарисовать и сделать заключение.

Метод диагностики: серологический — используют для выявления высоких титров и более выраженного нарастания количества противориккетсиозных антител в сыворотке крови больного и их идентификации.

При учете возможности перекрестных реакций между риккетсиями Провачека с риккетсиями Музера (они имеют общие антигенные характеристики) серологические исследования с этими диагностикумами необходимо проводить параллельно.

Компоненты реакции: исследуемая сыворотка больного человека (в которой определяют антитела к возбудителю эпидемического тифа), риккетсиозные диагностикумы Провачека и Музера (взвесь убитых риккетсий соответствующего вида), изотонической раствор NaCl.

Постановка: В 2-х рядах титруют сыворотку пациента с помощью физиологического раствора от 1:40 (в ряд серологических пробирок предварительно разливают по 2 мл изотонического раствора натрия хлорида. В первую из них доливают 2 мл сыворотки пациента, разведенной 1:40, и, смешав ее, 2 мл переносят во вторую, из второй — в третью и т.д.). В полученные двукратные разведения сывороток вносят по 1-2 капли риккетсиозных диагностикумов (в первый ряд — Провачека, во второй — Музера). Для создания контролей в предпоследнюю пробирку ряда вносят 2 мл сыворотки на физиологическом растворе и в последнюю — 2 мл смеси рикетсиозных диагностикумов Провачека и Музера на физиологическом растворе. Пробирки встряхивают и помещают в термостат при 37°С на 2 часа, затем сутки выдерживают при комнатной температуре (18-20°С).

Учет развернутой реакции агглютинации производят, оценивая последовательно каждую пробирку, начиная с контрольных. Контроль сыворотки больного — жидкость прозрачная, осадка нет. Контроль диагностикума — жидкость прозрачная, на дне осадок в виде белой «пуговки».

Положительная реакция «+» — хлопья агглютината в абсолютной прозрачной жидкости (белый «зонтик»); отрицательная реакция «-» — отсутствие агглютинации (белая «пуговка»).

Диагностический титр реакции 1:100.

Заключение: Исследуемая сыворотка содержит антитела к R. prowazekii — возбудителю эпидемического тифа в титре…….

2. Учесть рпга в диагностике сыпного тифа, зарисовать и написать заключение.

Данный серологический метод диагностики используют для выявления титра противориккетсиозных антител в сыворотке крови больного.

Компоненты реакции: исследуемая сыворотка пациента (материал берется не ранее чем на 7-ой день с момента заболевания), сыпнотифозный эритроцитарный диагностикум и физиологический раствор.

Постановка: В лунках полистироловых планшетов готовят ряд последовательных разведений исследуемой сыворотки на физиологическом растворе. Для создания контролей в предпоследнюю лунку вносят 0,5 мл сыворотки на физиологическом растворе и в последнюю 0,5 мл — сыпнотифозного эритроцитарного диагностикума на физиологическом растворе. Затем в опытные лунки добавляют по 0,1 мл разведенного сыпнотифозного эритроцитарного диагностикума, встряхивают и помещают в термостат на 2 ч. Положительным результатом «+» является гемагглютинация в лунках (осадок в виде красного «зонтика), отрицательным «-» — отсутствие гемагглютинации (красная «пуговка»).

Заключение: в исследуемой сыворотке обнаружены антитела к возбудителю сыпного тифа в титре……..