11. Методы лабораторной диагностики

Использу­ют бактериоскопический метод — обнару­жение возбудителя в толстой капле крови, взятой на высоте лихорадочной реакции, ок­рашенной по Романовскому—Гимзе. Также используют дополнительные бактериоскопические исследования: микроскопия в темном поле «висячей капли» крови и негативный метод Бурри, состоящий в просмотре иссле­дуемой капли крови, смешанной с тушью, серебрение боррелий в мазках крови или маз­ках-отпечатках из органов. Биопробу ставят для дифференциации В. recurrentis от возбуди­телей эндемического возвратного тифа: морс­кие свинки легко заражаются возбудителями клещевого возвратного тифа, а белые мыши и крысы — В. recurrentis. В качестве вспомога­тельного используют серологический метод с постановкой РСК.

Серологический метод: сывороточные антитела обнаруживают в реакции иммобилизации боррелий, либо в реакции нагрузки боррелий тромбоцитами.

Боррелии можно выделить с использованием среды BSK2 у больных из очагов кожных поражений, из крови и спинномозговой жидкости (при менингиальных формах), при исследовании переносчиков (в т.ч. снятых с людей) и теплокровных хозяев (наибольшая высеваемость — из мочевого пузыря) в природных очагах. Боррелии можно выявить в иксодовых клещах с помощью световой микроскопии (окраска по Романовскому — Гимзе), темнопольной и люминесцентной микроскопии, ПЦР.

Основной метод серологической диагностики — реакция непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) с корпускулярным антигеном B.afzelii, позволяющим выявлять антитела к боррелиям группы ИКБ.

12. Лечение и профилактика

Применяют предупредительную терапию (при положительных результатах исследования присосавшегося клеща) и лечение больных ИКБ тетрациклинами, пенициллинами и цефалоспоринами.

Специфическая профилак­тика не проводится. Неспецифическая про­филактика сводится к борьбе с завшивлен­ностью населения, в эндемических очагах — с клещами и грызунами. Ввиду формирования нестойкого иммунитета основу профилактики составляют раннее выявление и госпитализация всех больных, дезинсекция вещей больных и жилья, санитарная обработка контактировавших лиц.

Возбудители болезни Лайма

Лаймоборрелиоз (болезнь Лайма) — хроническая трансмиссивная природно-очаговая инфекция из группы иксодовых клещевых боррелиозов. Возбудителем болезни Лайма в Северной Америке является вид В. burgdorferi, который впервые был открыт в 1975 г. при обследо­вании детей, больных артритами, в городке Лайма (Lyme) в США, а в 1982 г. выделен из иксодового клеща У. Бургдорфером. На Евро-Азиатском континенте возбудите­лями этого заболевания являются В. garini и В. afzelii. Эти виды различаются между собой по антигенной структуре.

Переносчики на территории РФ — клещи Ixodes ricinus, I.persulcatus.

Морфология и культуральные свойства

Возбудители болезни Лайма представляют типичные по морфологическим и тинкториальным свойствам боррелии, которые хорошо культивируются на питательных средах при выделении из клещей. Выделить возбудитель из материала от больного (крови, ликвора) удается редко.

Распространение в природе и эпидемиология

Резервуаром возбудителей в природе являют­ся мелкие млекопитающие, главным образом лесные белолапчатые мыши. Заболевание пе­редается человеку через укусы клещей рода Ixodes и распространено в ареале обитания этих клещей на территориях Северной Америки, Австралии, Евразии, в том числе в России, пре­имущественно в летний период. Естественная восприимчивость людей высокая. От человека человеку заболевание не передается. В эндемичных районах до 20-80% членистоногих содержат спирохеты.

Антигенная структура

Возбудители болезни Лайма обладают сложной антигенной струк­турой. Они имеют белковые антигены фибрил­лярного аппарата (р41) и цитоплазматического цилиндра (р93), антитела к которым появля­ются на ранних этапах инфекции, но не обла­дают защитными свойствами. Протективную активность имеют антигены, представленные липидмодифицированными интегральными белками наружной мембраны, обозначаемые как osp {outer surface protein — англ.) А, В, С, D, E, F, детерминация синтеза которых осу­ществляется группой плазмид. OspA-антиген обладает антигенной вариабельностью, под­разделяясь на 7 сероваров, и является видоспецифическим.

Антигенный состав подвержен вариациям в процессе жизненного цикла боррелии. При их культивировании на питательных средах и нахождении в организме человека на поздних стадиях заболевания у боррелии преобладает антиген ospA, тогда как при пребывании в кле­ще и в организме человека на ранних этапах заболевания у них преобладает антиген ospC.

Факторы патогенности

Липидмодифицированные белки наружной мембраны обеспе­чивают способность боррелии прикрепляться и проникать в клетки хозяина. В результате взаимодействия боррелий с макрофагами про­исходит выделение ИЛ-1, который индуци­рует воспалительный процесс. Osp А-протеин принимает участие в развитии иммунопато­логических реакций, приводящих к развитию артритов. В этом процессе участвует также белок теплового шока, который начинает синте­зироваться бактериями при температуре 37 °С и который по своей структуре и молекулярной массе идентичен таковому человека.

Патогенез и клиника заболевания

Болезнь Лайма (син. хроническая мигри­рующая эритема, клещевой иксодовый боррелиоз) является хронической инфекцией с поражением кожи, сердечной и нервной систем, суставов. Впервые заболевание бы­ло описано в 1909 г. Афцелиусом (Afzelius).

После укуса клеща боррелии локализуются в месте внедрения или проникают непосредственно в кровоток. Инвазивная активность микроорганизма достаточно высока. После экспериментального заражения уже через 12 часов они проникают в различные органы и ткани. Проникают через гематоэнцефалический барьер, в результате чего их можно выделить из спиномозговой жидкости. Длительность инкубационного периода может варьировать от 3 до 32 дней. У 80% пациентов на месте укуса развивается блуждающая эритема в виде овальной или округлой папулы. При локальном поражении развивается симптом блуждающей эритемы, при диссеминированном — поражения опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой системы, вторичные поражения кожи и т.д. Диссеминированные поражение обусловлены циркуляцией боррелий. Развиваются васкулиты с окклюзией сосудов, а также аутоиммунные реакции. Через несколько месяцев или лет поражения суставов приобретают хронический характер. У части больных развиваются менингиты, менингоэнцефалиты, поражения сердечно-сосудистой системы и др.

Заболевание сопровождается развитием аутоиммунных и иммунопатологи­ческих процессов. Клиника подразделяется на 3 стадии:

1. Мигрирующая эритема, котоая сопро­вождается развитием гриппоподобного сим-птомокомплекса, лимфаденита и появлением в месте укуса клеща кольцевидной эритемы, которая быстро увеличивается в размерах.

2. Развитие доброкачественных поражений сердца и ЦНС в виде миокардита и асептичес­кого менингита, которые наступают на 4—5-й неделе заболевания и протекают в течение одного или нескольких месяцев.

3. Развитие артритов крупных суставов че­рез 6 недель и более от начала заболевания. Заболевание протекает доброкачественно. Прогноз благоприятный.

Иммунитет

Гуморальный, видоспецифический к антигенам клеточной стенки боррелий.

Микробиологическая диагностика

Исполь­зуются бактериоскопический, серологичес­кий методы и ПЦР в зависимости от стадии заболевания. Материалом для исследования служат биоптаты кожи, синовиальная жид­кость суставов, ликвор, сыворотка крови. На 1-й стадии заболевания проводится бактери­ологическое исследование биоптатов кожи из эритемы.

Начиная со 2-й стадии заболевания осу­ществляется серологическое исследование определением IgM или нарастания титра IgG ИФА или РИФ.

ПЦР используется для определения наличия боррелий в ликворе, суставной жидкости.

Лечение и профилактика

Этиотропная антибиотикотерапия — антибиотиками тетрациклинового ряда.

Специфическая профилак­тика не разработана. Не специфическая про­филактика сводится к использованию защит­ной одежды и борьбе с клещами.