10. Иммунитет

Антитела к менингококковым антигенам появляются на 5-й день болезни, их пик выявляется на 2-3-й неделе от начала заболевания. Постинфекционный иммунитет — напряженный, длительный, повтор­ные заболевания и рецидивы возникают редко. Иммунитет носит гуморальный характер. Антитела вырабатываются к различным анти­генам микробной клетки (полисахаридам и белкам). Полисахаридные антигены сероваров А и С обладают высокой иммуногенностыо, полисахарид серовара В почти неиммуногенен.

Противоменингококковые антитела передаются трансплацентарно от матери плоду и сохраняются на протяжении 2-5 месяцев после рождения ребенка.

11. Методы лабораторной диагностики

Осуществляется бактериоскопическим, бактериологическим, серологическим методами. Применяются и экспресс-методы диагнос­тики.

Материалы для исследования: слизь из носоглотки, спинномоз­говая жидкость (ликвор), кровь. Ликвор получают с помощью спин­номозговой пункции. При менингите ликвор вытекает из иглы струей (а не каплями, как в норме) и обычно бывает мутным. Носоглоточную слизь берут с задней стенки глотки специальным заднеглоточным там­поном на длинной изогнутой проволоке, не касаясь слизистой полос­ти рта, языка и зубов.

Менингококки во взятых материалах быстро погибают, особен­но при охлаждении, поэтому исследуемые материалы хранят до посе­ва не более 2-3 часов при 37°С.

1. Бактериоскопическому исследованию подвергают ликвор (луч­ше брать осадок после центрифугирования) и секционный материал (оболочки мозга). Из исследуемого материала готовят мазки, окраши­вают метиленовым синим или методом Грама. При положительном результате в поле зрения видны лейкоциты и диплококки в виде "ко­фейных зерен", расположенные как внеклеточно, так и внутри лейко­цитов. По Граму менингококки окрашиваются в розовый цвет, т.к. они грамотрицательны.

2. Бактериологический метод диагностики является основным. Он заключается в выделении и последующей идентификации возбу­дителя из носоглоточной слизи, ликвора, крови, геморрагических вы­сыпаний. Посевы осуществляют на плотные питательные среды., которые готовятся на основе бульона Хоттингера (или другого высококачественного бульона) с добавлением крови, сыворотки крови или асцитической жидкости. В среду добавляют для подавления роста сопутствующей микрофлоры антибиотик ристомицин, к которому менингококки устойчивы.

Исследуемую кровь в объеме 5-10 мл сначала засевают в колбу с 50 мл 0,1% МПА (полужидким) и инкубируют при 37°С 24 часа, затем пересевают на плотную питательную среду.

Далее проводят макро-и микроскопическое исследование вырос­ших колоний и выделяют чистую культуру на скошенном сыовороточном или кровяном агаре (параллельно колонии засевают на обычный скошенный агар, на котором менингококки не должны расти).

Идентификация проводится по антигенным свойствам (в реак­ции агглютинации на стекле) для определения серогруппы и биохи­мической активности (N.meningitidis биохимически малоактивна, разлагает с образованием кислоты без газа глюкозу и мальтозу, не фер­ментирует левулезу, сахарозу, лактозу, не образует индол и H₂S).

3. Серологический метод используют как для выявления менингококкового антигена в исследуемых материалах, так и для обнаруже­ния противоменингококковых антител в сыворотке крови больного. Применяют следующие серологические реакции — РИГА, РСК, ИФА. РИФ, встречный иммуноэлектрофорез.

4. Экспресс-диагностику проводят с помощью реакций коагглютинации и латекс-агглютинации. Обе реакции применяют для выявле­ния как N. meningitidis (в том числе и нежизнеспособных), так и их антигенов.

В реакции коагглютинации специфические противоменингококковые антитела сорбированы на клетках стафилококков, содержащих А-белок, который обладает способностью присоединять Fc-фрагмент IgG антител.

В реакции латекс-агглютинации специфические антитела связаны с час­тицами латекса.

И коагглютинацию, и латекс-агглютинацию ставят на предмет­ных стеклах, добавляя исследуемый материал (чаще всего ликвор) к специфическим противоменингококковым сывороткам. Видимый результат — агглютинация — наступает через 15-30 минут в виде обра­зования хлопьев.

Латекс-агглютинацию можно ставить и для обнаружения проти­воменингококковых антител в исследуемых сыворотках. В этом слу­чае используется частицы латекса с сорбированным на них менингококковым антигеном.