Диуретики и бета2-агонисты

К веществам, анализ которых обычно производится посредством ГХ-МС(/МС), относятся также диуретики и β2-агонисты. В частности, группа диуретиков характеризуется химическим разнообразием препаратов, назначаемых для сходных или идентичных целей. Для представителей этой группы веществ применяют преимущественно негативную ионизацию (Thieme et al., 2001; Thevis et al., 2002, 2003a), что обусловлено их кислотными свойствами, однако для некоторых диуретиков, в частности триамтерена, требуется позитивная ионизация. Для β2-агонистов основным подходом является протопирование анализируемого вещества с последующей детекцией позитивно заряженной молекулы. Как описано в "Методы анализа”, источники ионов, сопрягающие ГХ с МС, обычно позволяют генерировать протонированные или депротонированные молекулы без заметной их фрагментации. Таким образом, структурная информация об анализируемых веществах, специфичность и избирательность масс-анализаторов обеспечиваются применением индуцированной столкновениями диссоциации (CAD) ионизированных препаратов и последующим анализом производных фрагментов. Для этого необходимо иметь сведения про сродство к протонам и поведение продуктов диссоциации после эффективной активации анализируемых молекул с помощью CAD, которая существенно отличается по механизмам фрагментации молекул от электронного удара (EI). Для диуретиков, а также для основной массы β2-агонистов, за исключением салбутамола достаточно проведение качественного анализа. Обычно хроматограммы экстрагированных ионов делают возможной достаточно чувствительную детекцию этих веществ в биологических пробах, а положительный вывод об их наличии делается па основании существенного численного преобладания их результирующих ионов. В 2001 г. около 17,5 % случаев положительных результатов проведенного в 25 аккредитованных МОК лабораториях допинг-контроля относились к применению β2-агонистов, диуретики были обнаружены в 5 % случаев.

Допинг-контроль: количественный анализ

Для некоторых субстанций, включая стимуляторы, такие, как эфедрин, метаболиты анаболических стероидов, такие, как нандролон, и β2-агонисты, такие, как салбутамол, установлен пороговый уровень, на основании сравнения с которым делается вывод о положительных или отрицательных результатах теста. Основанием для такого решения стали различные причины. Эфедрины входят в состав многих противопростудных лекарственных препаратов, поэтому по антидопинговым правилам их применение является законным, если содержание производных норэфедрина, эфедрина и псевдоэфедрина в моче не превышает 5, 10 или 25 мг-мл'1 соответственно. Салбутамол относится к группе симпатомиметиков, является одним из 4 разрешенных для использования β2-агонистов (наряду с салметеролом, тербуталином и формотеролом) при условии их применения в виде ингаляции. Поскольку определить, как применялся препарат (орально в виде таблеток или в виде аэрозоля) и в какой дозировке, достаточно сложно, о присутствии салбутамола в пробах во время соревнований сообщают в соответствующую федерацию; если содержание вещества превышает 100 нг-мл'1. В период между соревнованиями установлен пороговый уровень 1 мг-мл"1, поскольку при использовании некоторых симпатомиметиков в дозах, существенно превышающих терапевтические, наблюдаются анаболические эффекты. Присутствие метаболита нандролона 5а-эстраи-За-ол-17-один (норандростерона) в моче профессиональных спортсменов может быть в определенной степени обусловлено эндогенной продукцией, поэтому для этого вещества установлено пороговое содержание 2 иг-мл*1 для мужчин и 5 нг-мл'1 для женщин. Для обоснования полученных значений были проведены многочисленные исследования, также были учтены различные факторы, которые могут влиять на уровень эндогенного образования этого метаболита, например значительный физиологический стресс или беременность, которые приводят к существенному повышению содержания этого вещества в моче. Количественное определение этих соединений осуществляется с использованием калибровочных кривых, которые строят на основании результатов определения стандартными методами соответствующих внутренних стандартов, обладающих сходными или идентичными физико-химическими свойствами (Schanzer, Donike, 1995).